PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN DE AZUCARES

ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS

ESCUELA DE INGENIERÍA QUÍMICA

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

AZÚCARES

INTEGRANTES:

FERNANDO BARRAGÁN COCA

JHONATAN VALLE

DOCENTE:

GALO INSUASTI

FECHA

12/05/2014

REACCIÓN DE MOLISCH

• OBJETIVOS

GENERAL:

Determinar mediante la prueba de Molish si se trata de un carbohidrato con la aparición de un anillo violeta en la interfase.

ESPECÍFICOS:

• Verificar en cada una de las pruebas si es un carbohidrato positiva o negativa si no lo es; realizando la reacción de Molish.

• Observar la formación del anillo violeta en la interfase, lo cual indicara que la prueba fue positiva tratándose con seguridad de un carbohidrato.

MARCO TEÓRICO:

REACCIONES DE COLORACIÓN

Es una reacción que tiñe cualquier carbohidrato presente en una disolución; es llamada así en honor del botánico austriaco Hans Molisch.

Se utiliza como reactivo una solución de α-naftol al 5% en etanol de 96º. En un tubo de ensayo a temperatura ambiente, se deposita la solución problema y un poco del reactivo de Molisch. A continuación, se le añade ácido sulfúrico e inmediatamente aparece un anillo violeta que separa al ácido sulfúrico, debajo del anillo, de la solución acuosa en caso positivo.

Es una reacción cualitativa, por lo que no permite saber la cantidad de glúcidos en la solución original.

PROCEDIMIENTO

Observación del proceso realizado

RESULTADOS PRÁCTICOS EN IMÁGENES

Resultado de la prueba de Molisch

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Como era de esperarse esta prueba dio positivo osea se identificó un carbohidrato en la muestra , evidenciándose claramente la formación de un anillo violeta en la interfase, esto se debió a que, al reaccionar el alfa naftol con los carbohidratos, este los tiñe, separando los carbohidratos del ácido sulfúrico añadido después, por medio del anillo violeta en la interfase

CONCLUSIONES      

 

• En la prueba de Molish(reactivo) con la glucosa presento un anillo violeta es con lo cual podemos concluir que para este tipo de azúcar da positivo y se puede decir que si se trata de un carbohidrato .

• En la prueba de Molish(reactivo) con fructosa al presentar un anillo violeta de interfase es positiva obteniendo con seguridad la presencia de un carbohidrato.

• En la prueba de Molish(reactivo) con sacarosa  presento un anillo violeta es positiva demostrando de esta manera que es un carbohidrato.

• En la prueba de molish la sacarosa, fructosa y glucosa, son carbohidratos por lo que dieron positivo a la Reacción de Molish, evidenciándose un anillo violeta entre el ácido sulfúrico y la muestra donde la coloración fue mayor para la sacarosa, disminuye en la fructosa y en la glucosa fue mínima.

BIBLIOGRAFÍA

WIKIPEDIA (2013),Reactivo de Molisch. Obtenido de:http://es.wikipedia.org/wiki/Reacci%C3%B3n_de_Molisch 27102013

REACCIÓN DE SELIWANOFF

OBJETIVO GENERAL:

Determinar si se trata de una cetosa o aldosa mediante la prueba de seliwanoff.

OBJETIVO ESPECÍFICO:

• Verificar en cada una de las pruebas si es positiva, se presentará un color rojo identificando una cetosa   o negativa  si no produce cambio de coloración, dando una aldosa; realizando la reacción de Seliwanoff.  

• Observar la formación de un color rojo característico de la reacción de Seliwanoff.

• Identificar cetosas mediante la reacción del resorcinol sobre los azucares analizados.

MARCO TEÓRICO:

Es una prueba química que se usa para distinguir entre aldosas y cetosas. Los azúcares son distinguidos a través de su función como cetona o aldehído. Si el azúcar contiene un grupo cetona, es una cetosa, y si contienen un grupo aldehído, es una aldosa. Esta prueba está basada en el hecho de que, al calentarlas, las cetosas son deshidratadas más rápido que las aldosas.

PROCEDIMIENTO

A continuación observar el trabajo realizado y la comprobación del mismo

RESULTADOS PRÁCTICOS EN IMÁGENES

reacción de seliwanoff

Resultados de la prueba de Seliwanoff  

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

El color rojo característico de esta prueba se formo en aquellos azúcares que tenían cetosas, debido a que este es lo único que esta prueba puede reconocer, puesto que poseen el grupo cetona, esto se comprobó debido a que al calentar los tubos que contenían las muestras las cetosas se deshidrataron mas rápido que las aldosas evidenciándose el cambio característico del color.

CONCLUSIONES

• En la prueba de seliwanoff(resorcinol) con glucosa  no presenta el color rojo característico de esta reacción es negativa por lo que no se trata de una cetosa.

• En la prueba de Seliwanoff (resorcinol)con fructosa al presentar el color rojo característico de esta reacción es positiva indicando la presencia de una cetosa.

• En la prueba de Seliwanoff(resorcinol) con sacarosa al presentar el color rojo característico de esta reacción es positiva identificándose una cetosa.

• Verificamos que la sacarosa hidrolizada (al estar separada la glucosa de la fructosa)  en la prueba de Seliwanoff fue positiva por la evidencia de  la formación de una coloración rojo.

BIBLIOGRAFÍA

WIKIPEDIA (2013), Reactivo de Seliwanoff. Obtenido de:

http://es.wikipedia.org/wiki/Prueba_de_Seliwanoff

2710201

PRUEBA DE FEHLING

OBJETIVO GENERAL:

Determinar si la muestra utilizada se trata de azúcares reductores mediante la prueba de fehling.

OBJETIVO ESPECÍFICO:

• Observar sí reacciona el reactivo de Fehling con cada una de las muestras (glucosa, sacarosa, fructosa, maltosa)

• Verificar el precipitado rojo producido de Cu2O

MARCO TEÓRICO:

El principal grupo de pruebas de azúcares reductores (Fehling y Benedict, entre otras) se basan en la capacidad de reducir las sales cúpricas a óxido cuproso, generalmente en medio alcalino, en el que éstas se encuentran disueltas, o acomplejadas con tartratos, citratos etc. En todos los casos citados la reacción tiene lugar en caliente al descomponerse el hidróxido cuproso por el calor, dando un precipitado de color ladrillo sobre el fondo azul del reactivo – a bajas concentraciones el color es sólo amarillento.

PROCEDIMIENTO

Observar el procedimiento realizado

RESULTADOS PRÁCTICOS EN IMÁGENES

reactivo de fehling reacción de fehling

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

La prueba mas clara que nos indica si esta reacción dio positiva o no es es un precipitado rojo ladrillo, esto se debe a que esta prueba reduce sales, de sales cúpricos a oxido cuproso (compuesto del color característico del precipitado) por medio del calor reduciendo el hidróxido cuproso, evidenciándose con el precipitado característico.

CONCLUSIONES

• Verificamos que la glucosa en la prueba de Fehling al dar un precipitado rojo ladrillo identificando de esta manera un azúcar reductor.

• En la fructosa en la prueba de Fehling al dar un precipitado rojo ladrillo identificando un azúcar reductor.

• para la sacarosa al hacerla reaccionar con Fehling da negativo debido a que  no posee carbonos américos libres por lo que carece de poder reductor. Pero al hidrolizar la sacarosa y al hacerla reaccionar con fehling da positivo indicando de esta manera la presencia de un azúcar reductor.

• Verificamos que la  hidrólisis de la sacarosa (al estar separada la glucosa de la fructosa)  en la prueba de Fehling fue positiva por la evidencia de un  precipitado rojo ladrillo indicando la presencia de un azúcar reductor.

BIBLIOGRAFÍA

http://es.wikipedia.org/wiki/Reactivo_de_Fehlin

PRUEBA DE BARFOED

OBJETIVO GENERAL:

Determinar si nuestra muestra problema es un azúcar reductor y ademas puede diferenciarse de un monosacárido de un disacárido.

OBJETIVO ESPECÍFICO:

• Observar mediante el tiempo si el azúcar analizados es un mono o disacárido

• Diferenciar correctamente valiéndose del tiempo de formación de un monosacarido y un disacárido

MARCO TEÓRICO:

Los disacáridos también pueden reaccionar, pero en forma más lenta. El grupo aldehído del monosacárido que se encuentra en forma de hemiacetal se oxida a su ácido carboxílico correspondiente. Muchas sustancias, entre ellas el cloruro de sodio,pueden interferir en la prueba.

Es un ensayo químico utilizado para detectar monosacáridos. Se basa en la reducción de cobre (II) (En forma de acetato) a cobre (I) (En forma de óxido), el cual forma un precipitado color rojo ladrillo.

RCOH + 2Cu+2 + 2H2O → RCOOH + Cu2O↓ + 4H

Los disacáridos también pueden reaccionar, pero en forma más lenta. El grupo aldehído del monosacárido que se encuentra en forma de hemiacetal se oxida a su ácido carboxílico correspondiente. Muchas sustancias, entre ellas el cloruro de sodio, pueden interferir en la prueba.  

PROCEDIMIENTO

Para verificar el procedimiento por favor observar el video

RESULTADOS PRÁCTICOS EN IMÁGENES

reactivo de Barfoed

Resultados de la prueba de Barfoed

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

La evidencia de la eficacia de esta reacción  es la formación de un precipitado de Cu2O, en ambos casos de monosacáridos y disacáridos, la diferencia es el tiempo de formación, lo cual determina la naturaleza del azúcar sea este mono o disacárido, esto se debe a que el cobre se reduce en forma de acetato a forma de oxido, los monosacaridos reaccionan de manera mas violenta mientras que los disacáridos se demoran mas, motivo por el cual se pueden distinguir por medio del tiempo.

CONCLUSIONES

• El reactivo de Barfoed con maltosa se produce un precipitado también rojizo pero luego de haber sometido a baño maría por al menos 15 minutos demostrando de esta manera que se trata de un azúcar reductor y además es un disacárido.

• El reactivo de Barfoed con la glucosa se produce un precipitado rojizo luego de someter la muestra a baño maría por unos 2 minutos  demostrándonos de esta manera que tenemos un azúcar reductor y debido al corto tiempo de la formación de precipitado también sabemos que es un monosacárido.

BIBLIOGRAFÍA

WIKIPEDIA (2013), Prueba de Barfoed. Obtenido de:

http://es.wikipedia.org/wiki/Prueba_de_Barfoed

27102013

 PRUEBA DE YODO

OBJETIVO GENERAL:

• Verificar si se produce reacción alguna entre el almidón y el reactivo lugol y compararlo  con el agua.

OBJETIVO ESPECÍFICO:

• Observar si se produce reacción con el almidón diluido en HCl con el lugol.

• Observar la formación del color violeta después de realizada la prueba.

MARCO TEÓRICO:

Es una reacción química usada para determinar la presencia o alteración de almidón u otros polisacáridos. Una solución de yodo - di yodo disuelto en una solución acuosa de yoduro de potasio - reacciona con almidón produciendo un color púrpura profundo.

Este tipo de prueba puede realizarse con cualquier producto que contenga almidón como ser patatas, pan o determinados frutos.

Esta reacción es el resultado de la formación de cadenas de poliyoduro a partir de la reacción del almidón con el yodo presente en la solución de un reactivo llamado Lugol. La amilosa, el componente del almidón de cadena lineal, forma hélices donde se juntan las moléculas de yodo, formando un color azul oscuro a negro. La amilopectina 1 , el componente del almidón de cadena ramificada, forma hélices mucho más cortas, y las moléculas de yodo son incapaces de juntarse, obteniéndose un color entre naranja y amarillo. Al romperse o hidrolizarse el almidón en unidades más pequeñas de carbohidrato, el color azul-negro desaparece. En consecuencia, esta prueba puede determinar el final de una hidrólisis, cuando ya no hay cambio de color constituyendo una evidencia experimental amplia mente utilizada.

La solución de yodo también reacciona con el glucógeno, aunque el color producido es más castaño y mucho menos intenso.

• PROCEDIMIENTO:   

Observar el procedimiento por favor

RESULTADOS PRÁCTICOS EN IMÁGENES

Resultado de la prueba del Yodo

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Este procedimiento se utiliza para observar la presencia o alteración de almidón en la muestra analizada, la evidencia es la formación de un color violeta, esto se debe a que la amilasa y la amilopectina (componentes del almidón) reaccionan con el yodo dando cada una su color característico, rojo y azul, lo cual produce que, al mezclarse los colores se combinen obteniéndose la mezcla resultante y característico de esta prueba violeta.

CONCLUSIONES

• Verificamos mediante la prueba del yodo la desaparición gradual del color típico del lugol (rojizo oscuro) y se produjo de manera casi instantánea la formación de un precipitado violeta oscuro bien definido constatando la hidrólisis progresiva del mismo y por supuesto la presencia de almidón.

• Respecto a la prueba del lugol con agua observamos que el lugol se mezcló en su totalidad produciendo una mezcla homogénea de color rojizo opaco.

BIBLIOGRAFÍA

WIKIPEDIA (2013), Prueba del Yodo. Obtenido de: http://es.wikipedia.org/wiki/Prueba_del_yodo

27102013

PRUEBA DE LA HIDRÓLISIS DE LA SACAROSA

OBJETIVO GENERAL:

• Realizar la prueba de la hidrólisis de la sacarosa.

OBJETIVO ESPECÍFICO:

• Observar las características y la coloración de la hidrólisis de la sacarosa después de añadir el reactivo de seliwanoff y fehling.

    MARCO TEÓRICO:

La sacarosa, o azúcar común, es un disacárido formado por alfa-glucopiranosa y beta-fructofuranosa.

Su nombre químico es alfa-D-Glucopiranosil - (1→2) -

beta-D-Fructofuranósido,2 mientras que su fórmula es C12H22O11.

Es un disacárido que no tiene poder reductor sobre el reactivo de Fehling y el reactivo de Tollens.

El cristal de sacarosa es transparente, el color blanco, es causado por la múltiple difracción de la luz en un grupo de cristales.

El azúcar de mesa es el edulcorante más utilizado para endulzar los alimentos y suele ser sacarosa. En la naturaleza se encuentra en un 20% del peso en la caña de azúcar y en un 15% del peso de la remolacha azucarera, de la que se obtiene el azúcar de mesa. La miel también es un fluido que contiene gran cantidad de sacarosa parcialmente hidrolizada.

La sacarosa, azúcar de mesa o azúcar de caña, es un disacárido de glucosa y fructosa. Se sintetiza en plantas, pero no en animales superiores. No contiene ningún átomo de carbono anomérico libre,3 puesto que los carbonos anoméricos de sus dos unidades monosacáridos constituyentes se hallan unidos entre sí, covalentemente mediante un enlace O-glucosídico. Por esta razón, la sacarosa no es un azúcar reductor y tampoco posee un extremo reductor.

Su nombre abreviado puede escribirse como Glc(a -1à 2)Fru o como

Fru(b 2à 1)Glc. La sacarosa es un producto intermedio principal de la fotosíntesis, en variados vegetales constituye la forma principal de transporte de azúcar desde las hojas a otras partes de la planta. En las semillas germinadas de plantas, las grasas y proteínas almacenadas se convierten en sacarosa para su transporte a partir de la planta en desarrollo.

• PROCEDIMIENTO:  

Para observar el procedimiento por favor

     RESULTADOS PRÁCTICOS EN IMÁGENES

hidrólisis de la sacarosa

     

     Resultados de la prueba de hidrólisis de la sacarosa

NOTA: No se obtuvo las imágenes del resultado final al cambiar de color que 
resultó naranja y amarillo

     

     

    DISCUSIÓN DE RESULTADOS

La prueba de yodo en la sacarosa hidrolizada dio los siguientes resultados.

SACAROSA HIDROLIZADA	REACCIÓN
1 Fehling	Positivo
2 Seliwanoff	Positivo

Fehling             =                              naranja

                Seliwanoff        =                             amarillo

CONCLUSIONES

Al realizar la  hidrolización  de la sacarosa con el reactivo de Seliwanoff dio un cambio de color a un color amarillo en forma de precipitado y al hidrolizar la sacarosa con el reactivo de Fehling dio un cambio de color a naranja en forma de precipitado.

     BIBLIOGRAFÍA:

• Mark Bergy , jeremy ; StryerLubert,John L. Tymoczko.: BIOQUÍMICA,PAG 309

• John McMurry,CengageLearning, Octava Edición,Biomoléculas-Carbohidratos, pag 1001

• KAIRUZ de Civeta, Luz A. “Introducción al estudio de la composición de los alimentos”. Universidad Nacional de Colombia. Bogotá. 1984. Pág. 31, 68, 108, 109.

• HOULUM, Jhon R: PRACTICAS DE QUIMICA GENERAL QUIMICA ORGANICA Y BIOQUIMICA. Centro de ayuda tecnica,Mexico-Buenos aires,1980, pag 405

• http://es.wikipedia.org/wiki/Az%C3%BAcar_reductor

• http://almez.pntic.mec.es/~mbam0000/paginas/LABORATORIOs/azucares.htm